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体外受精的精液处理

  • 来源:互联网
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  • 2015-10-05
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  男方禁欲5~7天,用手淫法将精液收集于一只无菌、无毒的容器内,待其液化后行常规检查,包括精液量、液化时间、精子计数、活动力、活动率、畸形率及红白细胞、凝集状况等。详略。常用的处理方法如下。

  1.“梯度:Percoll'’离心法取90%,45%Pereoll各2ml依次加入一支15ml离心管内(falcon 3029)再加入液化后的精液2ml,注意每层之间的界面要清楚,300g/mirl×20分钟后,取出底部精子,移入6ml试管(Falcon 2003)内,用10%血清Earle’s培养液2ml混匀,再离心200g/min×10分钟,弃上清液,再加入10%血清Earle’s培养液,将精子浓度调至10万~30万/ml,置5%c02,37℃培养箱内备用。

  2.上游法10%血清Earle’s培养液与精液按2:1混匀,离心300g/min×10分钟,弃上清,沉淀中加入10%血清Earle’s液2~3ml,轻轻混匀,再离心200g/min×10分钟,弃上清液,另取(Falcon 2003)小试管一支,加入10%血清Earle’s液0.5ml,用Pasteur吸管吸取经洗涤后的精子,缓慢加入试管底部,45。倾斜放置C02培养箱内1小时,使精子获能上游。收集上层云雾状含活力的精子0.5~0.8ml,调整精子浓度10万~30万/ml后备用。

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